Selenite bulion to pożywka wzbogacająca o selektywnych właściwościach, przeznaczona do izolowania patogennych bakterii z rodzaju Salmonella (łac. Salmonella). Jest bardzo skuteczny, jeśli konieczne jest wykrycie tego konkretnego patogenu wśród innych przedstawicieli mikroflory jelitowej. Podłoże jest używane zarówno do diagnostyki klinicznej, jak i do celów sanitarnych w testach żywności.
Charakterystyka ogólna
Selenitowy bulion jest przygotowywany na bazie proszku, który jest zhomogenizowaną mieszaniną różnych składników kompozycji. Kolor suchego materiału może być jasnożółty lub kremowy w zależności od rodzaju podłoża. Puder ma właściwości sypkie.
Gotowy bulion z selenitem jest płynnym przezroczystym podłożem o jasnożółtym kolorze. Masę tę przelewa się do pojemników, w których odbywa się wysiew w celu dalszej inkubacji.
Istnieją trzy główne rodzaje bulionu z selenitem:
- czysta pożywka - odpowiednia do izolacji Salmonelli z materiału klinicznego i sanitarnego;
- z dodatkiem mannitolu (bulion dwuskładnikowy) - przeznaczony wyłącznie do pracy z materiałem klinicznym;
- pożywka selenino-cysteinowa - może być stosowana do izolacji Salmonelli z biomateriału pacjentów patologicznych (kał, mocz itp.).
Te typy różnią się nieco kompozycją i funkcjami akcji.
Głównym zadaniem bulionu z seleninem jest promowanie akumulacji salmonelli, hamując wzrost towarzyszącej mu mikroflory. Umożliwia to nie tylko wykrycie patogenu w materiale, ale także późniejsze przeniesienie go na agar. Podłoże zostało opracowane przez Leiflera, który jako pierwszy odkrył selektywne działanie selenitu na Salmonellę.
Skład
Bulion seleninowy zawiera:
- hydrolizat kazeiny;
- laktoza;
- fosforan sodu;
- hydroselenit sodu.
Pożywka selenino-cysteinowa, oprócz tych składników, zawiera L-cysteinę i wodorofosforan sodu. Skład bulionu mannitolowego różni się tym, że zamiast hydrolizatu kazeiny zawiera trawienie trawienne tkanki zwierzęcej. W takim środowisku nie ma laktozy, ale jest mannitol. Ten ostatni działa jak fermentujący substrat i zapewnia właściwości buforujące bulionu.
Wszystkie składniki proszku, z wyjątkiem hydroselenitu sodu, są warunkowo nazywane częścią A, a selektywna substancja jest nazywana częścią B.
Zasada działania i właściwości środowiska
Bulion z selenitem działa jako nośnik danychz selektywnym działaniem. Selektywny efekt zapewnia toksyczność selenitu, który hamuje rozwój większości drobnoustrojów. Jednocześnie bakterie z rodzaju Salmonella są w stanie odbudować ten związek, eliminując tym samym toksyczny wpływ na własne komórki. Jednak w wyniku reakcji powstaje zasada, która zmniejsza szkodliwy wpływ seleninu na wzrost zasocjowanej mikroflory, dlatego konieczne staje się ustabilizowanie pH. Funkcję tę pełnią bakterie, które fermentują laktozę z wytworzeniem kwasu. Buforowanie podłoża zapewnia fosforan.
W bulionie dwuskładnikowym pH jest stabilizowane przez mannitol. Podłoże cysternowe poprawia selektywne działanie przeciwko Salmonelli. Taki bulion jest skuteczny w kontrolowaniu tła zakaźnego u pacjentów w nieostrym stadium choroby lub rekonwalescentów.
Przejawy cech wzrostu szczepów referencyjnych w pożywce można zaobserwować po 12-24 godzinach od rozpoczęcia inkubacji. W tym przypadku Salmonella tworzy bezbarwne kolonie.
Funkcje gotowania
Przygotowanie podłoża odbywa się w dwóch etapach. Najpierw sporządza się roztwór ze składnikiem selektywnym w ilości 4 gramów seleninu sodu na litr wody destylowanej. Następnie dodaj 19 gramów głównego proszku (część A). Roztwór jest dokładnie mieszany i podgrzewany do całkowitego rozpuszczenia cząstek, po czym wlewa się go do sterylnych probówek.
Podczas gotowania ważne jest przestrzeganiereżim temperaturowy, ponieważ medium jest niestabilne na przegrzanie. Sterylizację bulionu można przeprowadzić tylko w łaźni wodnej lub przy użyciu strumienia pary. Autoklawowanie pożywki jest surowo zabronione.
