Termin „mikroskopia” ma greckie korzenie. W tłumaczeniu oznacza to badanie obiektów za pomocą precyzyjnych instrumentów. Ostatnio coraz większą popularność zyskują mikroskopia fluorescencyjna i elektronowa.
Rozdzielczość
Pod nim z reguły rozumieją minimalną odległość, w której można zlokalizować wyraźnie rozróżnialne obiekty. Stopień penetracji w mikroskopijny świat, możliwość rozważenia wielkości badanego elementu będzie zależeć od rozdzielczości sprzętu. Przy dużym powiększeniu granice obiektów mogą się łączyć. W związku z tym istnieją pewne granice, poza którymi przybliżanie elementów jest bez znaczenia.
Metoda mikroskopii luminescencyjnej: mechanizm
Gdy energia pochłonięta przez substancję jest przekształcana w promieniowanie widzialne, pojawia się poświata. Nazywa się to luminescencją. Zjawisko to wynika z faktu, że niektóre substancje pod wpływem światła zaczynają emitować promienie o innej (zwykle dużej) długości fali. Ponadto niektóre przedmioty, które przy normalnym oświetleniu mają pewnąkolor, pod wpływem promieniowania ultrafioletowego zmieniają swój kolor.
Szczegóły
Obiekt, którego nie można zobaczyć w świetle ultrafioletowym, może emitować jasny połysk, jeśli zostanie potraktowany specjalną substancją. W nim elementy świecą w różnych kolorach w ciemności. Siła promieniowania jest inna, ale z reguły jest niewielka. Pod tym względem mikroskopia fluorescencyjna jest skuteczna w zaciemnionym pomieszczeniu. Korzystając z tego typu badań, obiekt jest oglądany w świetle, które sam emituje. Skład chemiczny tkanek, komórek wpłynie na jakość badania. Mikroskopia fluorescencyjna jest do pewnego stopnia uważana za badanie histochemiczne.
Klasyfikacja
Mikroskopia fluorescencyjna może być pierwotna lub wtórna. W tym drugim przypadku przedmiot obrabiany jest specjalnymi związkami, które nadają blasku. Pierwotna mikroskopia fluorescencyjna opiera się na własnej zdolności elementu do emitowania światła.
Sprzęt
Mikroskopia fluorescencyjna jest wykonywana przy użyciu różnych urządzeń. Ich głównym elementem jest iluminator. Wyposażony jest w lampę UV. Ponadto urządzenia wykorzystują zestaw filtrów. W niektórych urządzeniach istnieje całkiem sporo różnych konfiguracji. W zależności od tego, jaki kolor jest używany do wzbudzenia luminescencji - ultrafioletowy czy niebieski, pomiędzy źródłem światła a badanym obiektem umieszczany jest odpowiedni filtr. Ponieważ blask mikroskopijnego elementu jest energetycznie słabszy niż ekscytujące światło, zostanie uchwycony tylko pod jednym warunkiem. Nadmiar promieni ze źródła należy odciąć żółto-zielonym filtrem. Znajduje się na okularze urządzenia. Najbardziej wyraźny efekt luminescencji wystąpi, gdy filtr całkowicie odetnie promienie pochodzące ze źródła światła.
Z czego składa się instalacja światła widzialnego? Zawiera jasne źródło światła i mikroskop biologiczny. Pomiędzy lustrem urządzenia a lampą umieszczony jest filtr niebiesko-fioletowy. Może to być FS-1, UFS-3 i tak dalej. Żółty filtr zakładamy na okular mikroskopu. Z ich pomocą na obiekt pada niebiesko-fioletowe światło. Wzbudza luminescencję. Ale to światło może zakłócać widzenie blasku. Dlatego w drodze do oka odcina go żółty filtr. Oświetlenie ustawiane jest według metody Koehlera, z jednym wyjątkiem. Membrana kondensora musi być całkowicie otwarta. Podczas badania ważne jest, aby używać niefluorescencyjnego olejku immersyjnego. Aby zmniejszyć jego własny blask, dodaje się do niego nitrobenzen (2-10 kropli / 1 g).
Mikroskopia luminescencyjna: zastosowania w mikrobiologii
Zaletami tego typu studiów są:
- Możliwość obrazowania w kolorze.
- Wysokokontrastowe samoemitujące elementy na czarnym tle.
- Wykrywanie i lokalizacja określonych typów wirusów i drobnoustrojów.
- Zdolność do nauki przejrzystej i nieprzejrzystejżywe organizmy.
- Badanie procesów życiowych w ich dynamice.
Należy również powiedzieć, że mikroskopia luminescencyjna przyczynia się do rozwoju najlepszych metod histo- i cytochemii, diagnostyki ekspresowej.
